Practica

 

PRUEBA DE VIH (TAMIZAJE POR INMUNOCROMATOGRAFÍA)

 

TECNICA DE PRUEBAS DE VIH

INTRODUCCIÓN

·      El virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) se ha reconocido como el agente etiológico del síndrome de la inmunodeficiencia adquirida (SIDA)

·      La mayoría de los pacientes con SIDA tienen anticuerpos para las proteínas estructurales del virus de VIH. Es más, una proporción de miembros de grupos de alto riesgo clínicamente saludables como los homosexuales, hemofílicos o adictos a las drogas son también cero positivos. La infección por VIH se diagnostica mediante la detección de anticuerpos específicos para el virus. Actualmente se conocen dos tipos de VIH: VIH-1 y VIH-2 con 40 – 60 % de aminoácidos homólogos entre las dos cepas.

·      Esta prueba es un inmunoensayo rápido para la detección de anticuerpos para el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 y 2 en suero, plasma o sangre completa.

FUNDAMENTO

·      Las proteínas recomendables representando las regiones de las proteínas de la cubierta del VIH-1 Y VIH-2, la glicoproteína gp41, gp120 y la glicoproteína gp36 (VIH-2) respectivamente son inmovilizados en la región de prueba de la tira de nitrocelulosa.

·      Estas proteínas también se unen al oro coloidal y se impregnan por debajo de la región de prueba del casete. Una banda delgada de la membrana de nitrocelulosa también se sensibiliza como una región control.

·      Durante la prueba se aplican dos gotas de suero, plasma o sangre total del área de la muestra , seguido de dos gotas de buffer de lavado y se deja que reaccionen . los anticuerpos IgG específicos para las proteínas recombinantes del VIH-1 y VIH-2 reaccionaran con los antígenos unidos a las partículas de oro coloidal. El complejo partículas de oro coloidal – anticuerpos se mueven cromatograficamente a través de la membrana a las regiones de prueba y control del casete de prueba. una reacción positiva se visualiza por una banda de color rosa/purpura en la región de la prueba del casete.

OBJETIVO

·      Que el alumno realice un inmunoensayo rápido para la detección de VIH

 

 

MATERIALES

Ø  Equipo vacutainer

Ø   torundas

Ø  1 tubo rojo

Ø  Cronometro o reloj

Ø  Equipo para prueba de VIH

Ø  Centrifuga

TECNICA

 

·      PRUEBAS DE VIH

 

1)       Obtener la muestra de sangre por puncion venosa

2)       Centrifugar a 2500 rpm por 5 min para obtener el suero

3)       Marcar cada prueba con la información apropiada al paciente

4)       Tomar dos gotas del suero (aproximadamente 6ul) utilizando la pipeta proporcionada en el quipo y colocarlas cuidadosamente en el área de prueba de casete (dispositivo de prueba)

5)       Adicionar dos gotas ( aproximadamente 60 ul) del reactivo de lavado al área de muestra

6)       Permitir que trnscurran exactamenten 10 min para que la reacción ocurra. El resultado se debe leer exactamente al final de los 10 min del tiempo de incubación. Este es estable aproximadamente durante 5 a 10 min.

INTERPRETACIÓN

a)       El resultado es positivo: aparece en una línea rosa/purpura de cualquier intensidad en el área de prueba (T) y una línea en el área de control.

b)      El resultado negativo: aparece solo una línea en el área de control

v  El resultado es inválido en ausencia de una línea en el área de control. La prueba se debe repetir con un dispositivo nuevo independientemente de que aparezca una línea en el área de prueba.