TECNICA DE TIPIFICACIÓN

 

                                       

OBJETIVO

·      Al terminar la practica, ell alumno al haber encontrado un grupo A determinara si se trata de un subgrupo A1YA2.

GENERALIDADES

Los eritrocitos que poseen antígeno A pueden ser subdividido en A1 y A2, las células rojas del grupo A que aglutinen con anti A1lectina, se consideran del subgrupo, aquellas que no aglutinan con anti A1lectina, se clasifican como A2. Aproximadamente el 80%de las células, son A1y el restante 20 %se consideran A2.

 

 

PRINCIPIO

·      Los procedimientos usados con este reactivo, están basados en el principio de aglutinación, las células humanas nórmales, conteniendo antígenos se aglutinan en presencia de anticuerpos del antígeno correspondiente algunos extractos de semillas lectina contienen aglutinas con especifidad de grupos sanguinos humanos, el extracto de la semilla dolichus biflorus es virtualmente especifidad para el antígeno A1en células rojas humanas contiene un fito de hemoaglutinina, la cual como se dijo anteriormente aglutina las células rojas de los subgrupos A1 o A1B.

 

 

 

MATERIALES Y REACTIVOS

Ø  1 gradilla

Ø  4 tubos de ensaye

Ø  2 pipets pasteur con bulbo

Ø  1 centrifuga clínica o serofuge

Ø  Suero anti A1lectina

Ø  SSF en pizeta

 

 

 

 

 

APARATOS

 

o  Centrifuga serológica

Una centrifugadora es una maquina que pone una rotación de la muestra por la fuerza centrifuga, acelera la decantación o la sedimentación de sus componentes o fases ( generalmente una solida o liquida) según su densidad.
 

Tubos de ensaye

El es la parte del material de vidrio en química

 
 

o  Pipeta pasteur

La pipeta de Pasteur es similar a un utensilio de gotero, generalmente formada por un tubo de vidrio con borde cónico. Sirve para hacer la transferencia de pequeñas cantidades de líquidos

  

 

 

 

 

PROCEDIMIENTO

·      TIPIFICACIÓN  METODO EN TUBO

1.Preparar una suspensión de Glóbulos Rojos en solución Salina 5%.

2.Colocar una gota de anti A lectina en un tubo de 10x75.

3.Con una pipeta pasteur agregar una gota de la suspensión de glóbulos rojos

4.Mezclarbien y centrifugar 25000 rpm por un minuto.

5.Re suspender los globulos rojos cuidadosamente y examinar el tubo en busca de aglutinación.

 

 

•      Interpretación.

1.Cuando los glóbulos rojos son aglutinados de la fracción es positiva e indica la presencia de antígeno A1 y por lo tanto los glóbulos rojos son A1.

2. Cuando los glóbulos rojos no aglutinan, la reacción es negativa e indica la ausencia de antígeno A1 y los glóbulos son A2.

3. Cuando se investiga una sangre AB. Con anti A1 lectina, si aglutina es A1B si no aglutina A2B.

COMENTARIOS:

ü  No se requieren preparación especial  del paciente previo a la recolección de los especímenes, pueden usarse sangre recolectada con o sin anticoagulantes. Las muestras de sangre deben ser analizadas lo antes posible después de la obtención. Si el análisis tiene que ser retrasados, las muestras deben conservarse bajo refrigeración entre 2 y 8°c.

 

ü  Los glóbulos rojos recolectados y conservados en citrato de sodio, oxalato de amonio; con oxalato de potasio han de mostrado que mantienen su reactividad por 28 días. Los glóbulos rojos recolectados y conservados con sangre coagulada o en citrato de sodio u oxalato de sodio, han demostrado su reactividad por lo menos durante 14 días; si los hemoties se recolectan sobre EDTA o heparina estas deben ser analizadas dentro de las 48horas.

LIMITES DEL PROCEDIMIENTO:

ü  Todas las pruebas usando anti suero hemoagrupadores ABO, deben ser llevadas a cabo a temperatura más elevadas.

ü  El antígeno A1 no es totalmente expresado en células rojas de recién nacidos y pueden obtenerse falsos negativos

ü  Glóbulos rojos de más de 28 días pueden ser probados con este reactivo aun cuando las reacciones positivas ´pueden ser más débiles que las obtenidas de glóbulos rojos frescos