PRACTICA

TIPIFICACION DEL SUBGRUPO DE “A” USO DE LECTINA A1

 

 

OBJETIVO

·      Al terminar la práctica , el alumno al haber encontrado un grupo de “A” determinara si se trata de un subgrupo A1 o A2.

 

GENERALIDADES

·      Los eritrocitos que poseen antígeno A pueden ser subdivididos en A1 o A2, las células rojas del grupo A que aglutinen con Anti A1 Lectina, se consideran del subgrupo, aquellas que no aglutinan con Anti A1 lectina, se clasifican como A2. Aproximadamente el 80% de las celulas, son A1 y el restante 20% se consideran A2.

 

PRINCIPIO

·      Los procedimientos usados con este reactivo, están basados en el principio de aglutinación, las células humanas normales, conteniendo antígenos se aglutinan en presencia del anticuerpo del antígeno correspondiente algunos extractos de semillas lectinas contienen aglutinina con especificidad de grupos sanguíneos humanos, el extracto de la semilla dolichus biflorus es vitalmente especifica para el antígeno A1 en las células rojas humanas contienen un fito hemo aglutinina, la cual como se dijo anteriormente aglutina las células rojas de los subgrupos A1 o A1B.

 

MATERIAL Y  EQUIPO

·      1 gradilla

·      4 tubos de ensaye 10x75

·      2 pipetas Pasteur con bulbo

·      1 centrifuga clínica o serofuge

·      Suero Anti-Al Lectina

·      Solución Salina en pizeta.

 

METODO EN TUBO

 1.- Preparar una suspensión de glóbulos rojos en una solución salina al 5%

2.- Colocar una gota de anti-A lectina en un tubo de 10x75

3.- Con una pipeta Pasteur, agregar una gota de la suspensión de los glóbulos rojos.

4.- Mezclar bien y centrifugar a 2500 r.p.m. por un minuto

5.- Re suspender los glóbulos rojos cuidadosamente y examinar el tubo en busca de aglutinación.

INTERPRETACION

1.Cuando los glóbulos rojos son aglutinados la reacción es positiva e indica la presencia de antígeno A1 y por lo tanto los glóbulos rojos son A1

2. Cuando los glóbulos rojos no aglutinan, la reaacion es negativa e indica la ausencia ede antigrno A1 y los globulos rojos son A2.

3. Cuando se investiga en una sangre AB, con Anti Al lectina, si aglutina es AlB, si no aglutina es A2B.

COMENTARIOS

No se requiere preparación especial al paciente previo a la recolección de los especímenes, puede usarse  sangre recolectada con o sin Anticoagulantes. Las muestras de sangre deben ser analizadas lo antes posible después de la obtención. Si el Analisis tiene que ser retrasado, las muestras deben conservarse bajo refrigeración entre 2 y 8° C.

 

 

Los glóbulos rojos recolectado y conservados en citrato de sodio oxalato de amonio; con oxalato de potasio han demostrado que mantienen su reactividad por 28 días. Los glóbulos rojos recolectados y conservados con sangre coagulada o en citrato de sodio u oxalato de sodio, han demostrado su reactividad por lo menos durante 14 dias; si los hematíes se recolectan sobre EDTA o heparina, estas deben ser analizadas dentro de las 48 horas.

 

 

 

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

o   Todas las prueba usando antisueros hemoagrupadores ABO, deben ser llevadas a cabo a temperatura ambiente y nunca incubarse a temperaturas más elevadas.

o   El antígeno Al no es totalmente expresado en células rojas de recién nacidos y pueden obtenerse falsos negativos.

o   Globulos rojos de mas de 28 dias pueden ser probados con este reactivo aun cuando las reacciones positivas pueden ser mas débiles que las obtenidas de los globulos rojos.

o   Contaminación de los especímenes de sangro o de los materiales suplementarios usados, pueden interferir con los resultados de la prueba.